【摘 要】
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目的 探讨细粒棘球绦虫原头节对BMSCs向成纤维细胞分化的影响.方法 取4周龄C57BL/6小鼠股骨骨髓,利用贴壁培养法分离培养BMSCs;从感染细粒棘球蚴的羊肝中提取细粒棘球绦虫原
【机 构】
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石河子大学医学院第一附属医院普外科 新疆石河子832008;石河子大学医学院免疫学教研室 新疆石河子832008
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目的 探讨细粒棘球绦虫原头节对BMSCs向成纤维细胞分化的影响.方法 取4周龄C57BL/6小鼠股骨骨髓,利用贴壁培养法分离培养BMSCs;从感染细粒棘球蚴的羊肝中提取细粒棘球绦虫原头节.实验分为2组,实验组取第3代BMSCs和细粒棘球绦虫原头节共培养,对照组为单纯第3代BMSCs.共培养前后倒置显微镜观察BMSCs形态;培养1、3、5、7d,采用实时荧光定量PCR检测两组BMSCs中TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达,Western blot检测两组BMSCs中TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Smad7和磷酸化Smad2/3蛋白表达,ELISA检测两组上清中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白含量.结果 细粒棘球绦虫原头节与BMSCs共培养7d后观察到BMSCs形态发生改变,变成梭形和不规则三角形,更接近单独培养的小鼠成纤维细胞.培养1、3、5、7d,实时荧光定量PCR检测示,实验组TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA相对表达量均显著高于对照组;Western blot检测示,实验组TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、磷酸化Smad2/3蛋白相对表达量均显著高于对照组,Smad7蛋白相对表达量显著低于对照组;ELISA检测示,实验组上清中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白含量均显著高于对照组.上述指标两组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 细粒棘球绦虫原头节可能通过TGF-β1/Smad信号通路,促进BMSCs分泌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和TGF-β1,进而促进BMSCs纤维化.
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