TLR4全长及其截断体重组腺病毒的制备和功能鉴定

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yukitolee

【摘要】

：

制备脂多糖(LPS)Toll样受体4(TLR4)全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(△TLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒并鉴定其功能，用PCR方法扩增TLR4及△TLR4基因片段，酶切后亚克隆至腺病毒

【作者】

：

宋革孙学刚秦清和邓鹏刘靖华姜勇

【机构】

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第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

腺病毒 TLR4基因报告基因 NF-KB adenovirus toll-like receptor 4 report gene nuclear fac

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制备脂多糖(LPS)Toll样受体4(TLR4)全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(△TLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒并鉴定其功能，用PCR方法扩增TLR4及△TLR4基因片段，酶切后亚克隆至腺病毒穿梭质粒中，形成带有目的基因的穿梭载体pAdTrack-TLR4和pAdTrack-△TLR4，用BJ5183细菌同源重组法将目的基因重组于腺病毒骨架载体中；将重组腺病毒质粒用Pac I酶切线性化后，用脂质体法转染HEK-293细胞进行腺病毒的包装扩增，将重组腺病毒感染CHO-K1细胞，采用荧光毒酶报告基因方

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