【摘 要】
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目的:探讨左旋卡尼汀(LC)对脂多糖(LPS)损伤的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)的保护作用及自噬、凋亡的影响.方法:采用体外培养的小鼠PMVECs,分为对照组(Control组)、LPS组(10μg/ml,3、6、12、24 h)、LPS(10μg/ml,24 h)+LC(终浓度为2.5、5、10μg/ml)(LC组).Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,细胞免疫荧光染色法检测自噬小体,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3及凋亡蛋白Caspase-3的含量,CCK-
【机 构】
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温州医科大学低氧医学研究所,浙江 温州325035
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目的:探讨左旋卡尼汀(LC)对脂多糖(LPS)损伤的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)的保护作用及自噬、凋亡的影响.方法:采用体外培养的小鼠PMVECs,分为对照组(Control组)、LPS组(10μg/ml,3、6、12、24 h)、LPS(10μg/ml,24 h)+LC(终浓度为2.5、5、10μg/ml)(LC组).Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,细胞免疫荧光染色法检测自噬小体,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3及凋亡蛋白Caspase-3的含量,CCK-8法检测细胞活力.结果:① 与Control组比较,LPS 6 h、12 h、24 h组PMVECs细胞活力显著受到抑制,细胞凋亡率、自噬蛋白LC3Ⅱ表达显著增高(P均<0.01),LC3蛋白阳性表达.②与LPS 24 h组比较,各浓度LC组PMVECs细胞活力显著提高、自噬蛋白LC3II表达水平显著升高(P均<0.01),而PMVECs凋亡率和凋亡蛋白Caspase-3表达水平均明显降低(P<0.05).结论:LC具有提高LPS刺激的小鼠PMVECs活性、促进PMVECs自噬、抑制凋亡的作用.
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