坦布苏病毒MM1775株反向遗传操作系统的建立

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:llllgy
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本研究将坦布苏病毒MM1775株全基因组分3段克隆,获得3个重组质粒,利用融合PCR方法扩增得到5'端含有T7启动子的病毒全长cDNA,经体外转录得到感染性的RNA,将RNA转染DF-1细胞,48h后出现细胞病变。当细胞病变达到90%,将细胞上清接种DF-1细胞,72h后进行间接免疫荧光(indirect immunofulorescence,IFA)和RT-PCR鉴定,结果表明拯救病毒成功。序列测定结果显示,拯救毒的全基因组序列与亲本毒完全一致,表明MM1775反向遗传操作系统构建成功,为进一步研究坦布
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