贝氏柯克斯体热休克蛋白B基因的克隆与表达

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目的克隆贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)热休克蛋白B(HspB)基因并在大肠杆菌细胞内高效表达.方法采用PCR方法,从贝氏柯克斯体新桥株基因组DNA中扩增出HspB的基因片段,鉴定后将目的片段与原核表达载体pQE30连接,构建重组表达质粒pQE30/hspB,IPTG诱导该重组质粒转化的大肠杆菌产生HspB重组蛋白.结果 (1)PCR扩增获得长约1556bp的 hspB基因片段.(2)SDS-PAGE证明,HspB重组蛋白的分子量为53.7kDa.(3)经薄层扫描分析,表达蛋白约占全菌体
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