慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能与单个核细胞乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的关系

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目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)及树突状细胞(DC)内HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)的存在状况,DC成熟度及功能状态与DC或PBMC中HBV cccDNA载量的关系.方法 分离29例CHB患者和10例健康对照者的PBMC,用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和重组人IL-4诱导分化DC.实时定量PCR检测PBMC和培养第7天所得DC中HBV cccDNA载量,流式细胞仪分别检测其表面CD209、CD80、CD86、人类白细胞抗原(HLA)-DR和CD1a的表达,混合淋巴细胞反应检测DC诱导同种异体T淋巴细胞增殖能力,ELISA检测DC培养上清液中IL-12水平.数据行t检验和方差检验.结果 所有29例CHB患者的DC内检测不出HBV cccDNA,其中16例CHB患者PBMC内检测出HBV cccDNA.PBMC中HBV cccDNA阳性患者DC表面分子CD209(r=0.793,P<0.01)、CD80(r=0.581,P<0.05)、CD86(r=-0.698,P<0.01)、HLA-DR(r=-0.817,P<0.01)、CD1a(r=-0.734,P<0.01)表达、IL-12水平(r=-0.632,P<0.05)和诱导同种异体T淋巴细胞增殖的能力(r=-0.617,P<0.05)与HBV cccDNA载量呈负相关.29例CHB患者DC表面分子(CD209、CD80、CD86、HLA-DR、CD1a)表达水平、DC培养上清液中IL-12分泌水平、DC刺激同种异体T淋巴细胞能力均显著低于健康对照,其中PBMC中HBV cccDNA阳性组较阴性组下降更为明显(P<0.05,P<0.01).结论 CHB患者DC功能和成熟度较低,其PBMC中可检测到HBV cccDNA;且PBMC中载量越高,DC功能和成熟度越低.
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