【摘 要】
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对GenBank上已发布的虎、狮、豹等猫科物种的线粒体基因序列进行多重比对，基于虎特异性单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）位点设计并合成一对用于虎种源性成分检测的特异性引物和双标记探针，同时以肌肉生长抑制素基因（myostatin,MSTN）作为内参靶标合成引物和不同荧光素标记的探针。经体系优化，建立了可以用于检测虎源性成分的双重荧光PCR方法。
【基金项目】
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海关总署科技项目（2020HK140）；
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对GenBank上已发布的虎、狮、豹等猫科物种的线粒体基因序列进行多重比对，基于虎特异性单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）位点设计并合成一对用于虎种源性成分检测的特异性引物和双标记探针，同时以肌肉生长抑制素基因（myostatin,MSTN）作为内参靶标合成引物和不同荧光素标记的探针。经体系优化，建立了可以用于检测虎源性成分的双重荧光PCR方法。该方法具有良好的特异性和灵敏度，能够有效检测动物制品中的虎源性成分并可对采样和核酸提取进行质量控制；通过对采集的15份虎毛、虎粪便、豹毛及猫毛等样品进行检测鉴定，结果显示建立的双重荧光PCR方法可特异性检测鉴定出虎源性成分，与其他猫科动物样品无交叉反应。本研究建立的虎源性成分双重荧光PCR鉴定方法可用于口岸截获的疑似虎制品的精准快速检测、野生动物追踪溯源。本研究为保护濒危虎物种、打击走私虎制品提供一种特异性更强的快检手段。
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