【摘 要】
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目的 探讨纳米孔实时测序技术快速筛查水中嗜肺军团菌的可行性.方法 使用荧光定量PCR对某单位3件公共场所水样进行军团菌通用引物检测,同时基于MinION纳米孔测序对3件样本提
【机 构】
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中国人民解放军疾病预防控制中心生物安全科,北京100071;军事科学院军事医学研究院;中国人民解放军疾病预防控制中心生物安全科,北京100071;南昌航空大学环境与化学工程学院;中国人民解放军疾病预防
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目的 探讨纳米孔实时测序技术快速筛查水中嗜肺军团菌的可行性.方法 使用荧光定量PCR对某单位3件公共场所水样进行军团菌通用引物检测,同时基于MinION纳米孔测序对3件样本提取的核酸混合后进行宏基因组测序,并使用WIMP流程进行序列比对分析.基于测序结果,进一步对3件样本进行嗜肺军团菌特异引物荧光定量PCR检测.结果 荧光定量PCR结果显示,3件样本军团菌检测均为阳性或弱阳性,宏基因组实时测序结果中有4条序列为军团菌属,其中1条序列匹配为嗜肺军团菌,针对嗜肺军团菌的荧光定量PCR进一步确认其中1例样本为嗜肺军团菌弱阳性.结论 纳米孔实时测序在本研究中检测到军团菌相关序列,并进一步明确为嗜肺军团菌,结果与荧光定量PCR一致,有望成为环境样本微生物快速有效的鉴定方法.
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