花青素对电离辐射引起骨髓c-kit阳性细胞损伤防护作用的体外研究

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目的观察花青素对电离辐射致小鼠骨髓c-kit阳性细胞损伤的防护作用及可能的作用机制。方法经磁珠细胞分选法获得小鼠骨髓c-kit阳性细胞,分为对照组和花青素组,每组再分成3份,分别接受0、1及4 Gy的137Csγ射线照射。对照组加700μL细胞悬液及等体积的无血清造血干/祖细胞扩增培养基,花青素组加700μL细胞悬液及含2×10-5mol/L花青素的等体积无血清造血干/祖细胞扩增培养基(37℃,5%CO2),照射前30 min加入,照射后继续培养18 h。采用化学发光法检测小鼠骨髓c-kit阳性细胞的细胞活力,以相对荧光强度(RLU)表示。甲基纤维素半固体培养法检测克隆形成数目(CFU-GM)。流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)及磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)平均荧光强度。结果组内比较:与0 Gy比较,经1 Gy和4 Gy照射后小鼠骨髓c-kit阳性细胞活力下降,CFU-GM下降,细胞内ROS增加,γ-H2AX平均荧光强度增加(P<0.05)。组间比较:与1 Gy和4 Gy对照组比较,花青素1 Gy和4 Gy组骨髓c-kit阳性细胞活力增加,CFU-GM增加,细胞内ROS降低,DNA损伤程度(γ-H2AX平均荧光强度)降低(P<0.05)。结论花青素通过降低细胞内ROS水平及DNA损伤程度起到对受照射小鼠骨髓c-kit阳性细胞的防护作用。
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