【摘 要】
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采用化学裂解和酶解相结合的方法，以加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解反应体系，用PEG-8000进行DNA沉淀，从双孢蘑菇堆肥后发酵的4个代表时期培养料样品中提取微生物总DNA，再以总D
【机 构】
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中华人民共和国农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室,南京农业大学生命科学院微生物系,上海海洋大学
【基金项目】
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农业部公益性行业科研专项项目“食用菌菌种质量评价与菌种信息系统研究与建立”（编号：nyhyzx07008）的部分研究内容.
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采用化学裂解和酶解相结合的方法，以加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解反应体系，用PEG-8000进行DNA沉淀，从双孢蘑菇堆肥后发酵的4个代表时期培养料样品中提取微生物总DNA，再以总DNA为模板，以专用引物F27和R1498进行PCR扩增，获得16SrDNA片段，经纯化后构建4个时期样品的细菌16SrDNA文库。试验结果表明，本试验获得的总DNA质量较好，采用PCR扩增可获得多个细菌、放线菌和真菌特异片段；细菌16SrDNA文库的目的片段插入效率在90％以上。
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