CEL I酶的高效检测及其在Eco—TILLING中的高效应用

来源 :现代农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gift19852003
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CELI酶是Eco—TILLING技术的关键酶。实验采用酶切连接的方法构建了酶切位点上插入突变的质粒,应用该质粒能方便有效地检测CELI活性。进一步简化CELI酶的提取方法,并对每一步提取液样品进行活性检测。结果表明,芹菜汁也具有明显的酶切活性,进一步的提纯能提高其活性,琼脂糖凝胶电泳也能获得直观的检测结果,通过简化程序可高效应用于植物Eco-TILLING分析。该研究结果有利于Eco—TILLING技术的广泛使用,对于建立简易而又有效的点突变检测方法具有重要的意义。
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