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目的
分析高表达组蛋白去乙酰化酶（sirtuin 1，SIRT1）对高糖高脂培养胰岛微血管内皮细胞（islet endothelial cells，IEC）内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达及活性的影响。
方法合成含绿色荧光蛋白报告基因的小鼠SIRTl基因重组质粒，以Lipofectamine 2000转染IEC后以高脂或高糖高脂处理48 h。高脂组以0.5 mmol/L棕榈酸处理；高脂高糖组以33.3 mmol/L葡萄糖+0.5 mmol/L棕榈酸处理。应用Western印迹法检测SIRTl基因转染效果；应用实时荧光定量PCR及Western印迹法检测eNOS的基因及蛋白水平；应用硝酸还原酶法检测培养细胞上清中NO的水平。
结果相对于正常对照组，高脂培养IEC eNOS基因及蛋白水平无明显变化；但高脂高糖环境下，eNOS的基因及蛋白水平明显下降。高表达SIRT1不仅可升高高脂培养内皮细胞eNOS蛋白表达，且可升高高脂高糖培养内皮细胞eNOS mRNA及蛋白表达。相对于正常对照组，高脂培养使内皮细胞分泌NO水平明显下降，高糖高脂培养使内皮细胞NO水平进一步下降，高表达SIRT1不仅可升高基础状态下内皮细胞的NO水平，且可升高高脂、高脂高糖培养内皮细胞的NO水平，差异具有统计学意义。
结论SIRT1可改善高糖高脂培养胰岛微血管内皮细胞的eNOS表达及活性，使内皮源性NO分泌增加，因而可能有助于改善胰岛B细胞功能，在糖尿病的药物开发、基因治疗及胰岛移植治疗中具有广阔的前景。