【摘 要】
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目的探讨黄芩苷改善IL-1β诱导的软骨细胞凋亡机制,旨在为临床治疗骨关节炎（Osteoarthritis,OA）提供新的靶点。方法将C28/I12细胞以1×104个/孔的密度接种于96孔板24 h,然后分别用10 ng/mL IL-1β和/或不同浓度（10、20和40μmol/L）的黄芩苷处理12 h,处理0、24、48和72 h。CCK-8和EdU实验用于评估黄芩苷对IL-1β处理的人软骨细胞增
【机 构】
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江苏省第二中医院/南京中医药大学第二附属医院涟城门诊部
【基金项目】
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江苏省卫生健康委科研项目（H2019099）；
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目的探讨黄芩苷改善IL-1β诱导的软骨细胞凋亡机制,旨在为临床治疗骨关节炎（Osteoarthritis,OA）提供新的靶点。方法将C28/I12细胞以1×104个/孔的密度接种于96孔板24 h,然后分别用10 ng/mL IL-1β和/或不同浓度（10、20和40μmol/L）的黄芩苷处理12 h,处理0、24、48和72 h。CCK-8和EdU实验用于评估黄芩苷对IL-1β处理的人软骨细胞增殖的影响;TUNEL和流式细胞术实验用于评估黄芩苷对IL-1β处理的软骨细胞凋亡的影响;Western blot实验用于检测黄芩苷对增殖和凋亡相关蛋白表达的影响;ELISA检测用于评估黄芩苷对IL-1β处理的软骨细胞炎症反应的影响。MDC染色、qRT-PCR、Western blot实验评估黄芩苷对IL-1β处理的软骨细胞自噬的影响。最后通过与雷帕霉素联合处理,验证黄芩苷对IL-1β处理的软骨细胞增殖、凋亡、炎症反应和自噬的影响。结果结果表明,黄芩苷以时间和剂量依赖性方式显著提高了IL-1β刺激下软骨细胞的活力和增殖能力,同时抑制细胞凋亡,改善细胞的炎症反应。此外黄芩苷能够明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞的自噬。雷帕霉素可部分逆转黄芩苷对IL-1β刺激的软骨细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响。结论黄芩苷通过自噬依赖性激活mTOR信号通路促进IL-1β处理的软骨细胞增殖,抑制其凋亡和炎症,从而对OA具有潜在的治疗作用。
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