目的 探讨小鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)基因修饰的树突状细胞(Ad-mTERT-DC)在体内诱导抗肝癌活性的情况。方法 选用BalB/c小鼠肝癌种植模型,用携带mTERT基因的重组腺病毒载体(Ad-mTERT)转染小鼠体外培养的DC,对同系小鼠进行免疫。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脾细胞体外抗原再刺激后白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平,酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测分泌IFN-γ细胞的数量,51Cr释放法检测细胞毒T淋巴细胞杀伤活性。按种H22细胞后,观察肿瘤大小及荷瘤小鼠存活情况。并进一步观察,在H22移植瘤存在的情况下,Ad-mTERT-DC是否能够有效抑制肿瘤生长。结果 小鼠脾细胞体外接受抗原再刺激后,Ad-mTERT组IL-2和IFN-γ水平以及IFN-γ分泌细胞的数量分别为871.25pg/ml、169.15ng/ml和378/10^6个脾细胞,显著高于Ad-GFP组(131.6pg/ml、15.4.g/ml和36/10。个脾细胞,均P〈0.05)、DC组(71.3pg/ml、10.5ng/ml和21/10。个脾细胞)和PBS组(65.8pg/ml、7.4ng/ml和18/10。个脾细胞,均P〈0.05)。Ad-mTERT.DC能诱导特异性CTL的产生,在效靶比为90:1时,Ad-mTERT组的特异性杀伤率为58.7%,明显高于Ad-GFP组(10.3%)、DC组(2.9%)和PBS组(1.7%)。接种后第27天,Ad-mTERT组中成瘤小鼠的肿瘤平均直径明显低于各对照组(P〈0.05),小鼠存活时间明显延长(P〈0.05)。Ad-mTERT组抑瘤率为43.6%,明显高于PBS组、DC组和Ad-GFP组(均P〈0.01)。结论 Ad-mTERT-DC在小鼠体内可诱导出mTERT抗原特异性的抗肿瘤活性,对肝癌有预防和治疗作用。
负载小鼠端粒酶逆转录酶基因的树突状细胞体内诱导抗肝癌免疫应答
【摘 要】
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目的 探讨小鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)基因修饰的树突状细胞(Ad-mTERT-DC)在体内诱导抗肝癌活性的情况。方法 选用BalB/c小鼠肝癌种植模型,用携带mTERT基因的重组腺病毒载体(Ad-mTERT)转染小鼠体外培养的DC,对同系小鼠进行免疫。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脾细胞体外抗原再刺激后白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平,酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测
【机 构】
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中山大学附属第三医院肝脏移植中心中山大学器官移植研究所,广州510630,中山大学附属第三医院肝脏移植中心中山大学器官移植研究所,广州510630,中山大学附属第三医院肝脏移植中心中山大学器官移植研究
【发表日期】
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2009年31期
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