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目的
应用表位多肽与人类白细胞抗原(HLA) Ⅰ类分子结合力和解离率分析建立新型T淋巴细胞表位体外筛选方法。
方法采用基于矩阵算法的SYFPEITHI和BIMAS数据库预测6种胰岛细胞自身抗原[包括谷氨酸脱羧酶65(GAD65)、胰岛素瘤相关抗原2(IA-2)、前胰岛素原(PPI)、胰岛特异性葡萄糖6-磷酸酶催化亚基相关蛋白(IGRP)、胰岛淀粉样多肽(IAPP)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)]的表位序列，根据预测的结合力指数和已有数据分析筛选并合成15个HLA-A2限制性候选表位多肽。采用HLA-A2转基因的T2细胞检测候选肽与HLA-A2的分子结合力，通过多肽/HLA复合物解离率实验分析复合物的稳定性。采用单因素方差分析进行数据统计。
结果T2细胞肽结合力分析显示，15个候选表位多肽中，IGRP152～160、IGRP215～223、IGRP228～236、PPI2～10、胰岛素B10～18、IA-2172～180、GFAP143～151与HLA-A2的分子结合力>80%。肽/HLA复合物解离率分析显示，上述结合力较强的7个表位多肽中，胰岛素B10～18、IGRP228～236、GFAP143～151、IA-2172～180 4 h解离率低于20%。
结论本实验建立的候选多肽结合力与解离率相结合的T淋巴细胞表位体外筛选方法有助于减少研究中目标肽数量，推进1型糖尿病T淋巴细胞诊断方法的研究。