目的建立超高效液相色谱-飞行时间质谱（ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight mass spectrometer, UPLC/Q-TOF）同时定性定量检测乌头类植物中14种乌头生物碱及其代谢产物的含量的分析方法。方法采用SPE固相萃取小柱提取净化,用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱,Dual AJS ESI源,正离子模式下采集的数据进行定性定量分析。色谱柱为Aglient SB-C₁₈（2.1 mm×50 mm,2.7μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸水（含5 mmol/L乙酸铵）,梯度洗脱,流速0.3 mL/min。结果14种乌头生物碱及其代谢产物在10～100 ng/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检出限为0.1～5.0 ng/mL,定量限为0.5～10 ng/mL,加标回收率为81.2%～113.7%（相对标准偏差（relative standard deviation, RSD）<10%, n=6）。结论该方法能快速、准确地对乌头类植物中的乌头生物碱成分进行定性定量检测,对该植物毒性和药效的深入研究提供了一种新的方法。