【摘 要】
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利用高效液相色谱（HPLC）法,对重组嗜热β-葡萄糖苷酶（Fpglu1）转化稀有人参皂苷（Rd和CK）进行研究,并表征了其催化动力学参数.利用同源模建和分子动力学模拟等生物信息学技术,探究了F
【机 构】
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长春中医药大学吉林省人参科学研究院,长春工业大学化学与生命科学学院,中国科学院长春应用化学研究所长春质谱中心,上海交通大学生命科学技术学院
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利用高效液相色谱（HPLC）法,对重组嗜热β-葡萄糖苷酶（Fpglu1）转化稀有人参皂苷（Rd和CK）进行研究,并表征了其催化动力学参数.利用同源模建和分子动力学模拟等生物信息学技术,探究了Fpglu1转化人参皂苷的结构基础及其相互作用.结果表明,Fpglu1能够水解人参总皂苷生成稀有皂苷Rd和CK,其催化人参皂苷Rb1,Rb2和Rc的Km值分别为0.318,1.840和5.269 mmol/L;酶的转换数(kcat)值分别为144.191,0.572和0.011 s-1.当转化时间分别为6和102 h时,Rd和CK的产率达到最大,分别为60%和93%.通过对该酶的结构预测及皂苷分子的对接研究发现,底物位于由疏水性氨基酸构成的底物口袋中,氨基酸残基Glu194和Glu367是参与催化作用的关键,且实验测得的酶促反应动力学参数（Km）与对接的相互作用能量值存在线性关系.
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