【摘 要】
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根据番茄不孕病毒(TAV)RNA3上外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,结果从感病组织中扩增出与预期的642bp大小一致的目
【机 构】
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云南农业大学云南省植物病理重点实验室,云南农业大学云南省植物病理重点实验室
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根据番茄不孕病毒(TAV)RNA3上外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,结果从感病组织中扩增出与预期的642bp大小一致的目标片段,而健康组织无此扩增产物;将PCR产物插入pGEM-T载体克隆并测序,序列分析表明与TAV不同株系的序列同源性达到96.2%以上;将感病组织总RNA以10倍梯度稀释成不同浓度,测出RT-PCR检测TAV的灵敏度为10-5;PCR产物克隆作为RT-PCR反应的阳性对照,解决了毒源保存和传播的问题,从而建立了TAV快速、
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