【摘 要】
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目的:探索以肺炎链球菌胆碱结合蛋白A(pneumococcal choline binding protein A,rCbpA)为抗原的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)反应模型在肺炎球菌性社区获得性肺炎患者(community acquired pneumonia,CAP)检测中的应用价值.方法:设计合成cbpA基因序列引物,通过PCR扩增,构建克隆质粒PGM-T/cbpA和表达质粒.经异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl phospho
【机 构】
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武汉市第四医院/华中科技大学同济医学院附属普爱医院检验科,武汉430033;大连医科大学临床免疫与微生物教研室,大连116100
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目的:探索以肺炎链球菌胆碱结合蛋白A(pneumococcal choline binding protein A,rCbpA)为抗原的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)反应模型在肺炎球菌性社区获得性肺炎患者(community acquired pneumonia,CAP)检测中的应用价值.方法:设计合成cbpA基因序列引物,通过PCR扩增,构建克隆质粒PGM-T/cbpA和表达质粒.经异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl phosphorothioate,IPTG)诱导表达重组蛋白rCbpA;构建ELISA反应模型(rCbpA作为抗原),检测健康组及肺炎球菌性CAP患者组血清中相应的IgM和IgG抗体.并与痰培养、血培养结果相比较.运用卡方检验分析结果差异.结果:成功获得肺炎链球菌重组蛋白rCbpA,建立rCbpA-ELISA模型.以rCbpA-IgM模式检测肺炎球菌性CAP患者组的敏感性为22.5%,与血培养及痰培养法检测的敏感性无统计学差异(x2=3.529,P=0.060 ;x2=0.075,P=-0.785);但其特异性为100%,明显高于痰培养(x2=12.754,P=0.000).rCbpA-IgG模式检测肺炎球菌性CAP患者组的敏感性为50%,与血培养、痰培养检测的敏感性差异具有统计学意义(x2=17.635,P=0.000;x2=7.912,P=-0.005).结论:血清重组蛋白rCbpA对IgM类抗体有高特异性、对IgG类抗体有高敏感性,且该检测方法快,判定结果更准确客观,可以有效提高肺炎球菌感染性肺炎的诊断价值.
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