【摘 要】
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目的:建立CROC-1基因表达被阻断的FL-CROC-1-细胞系,研究CROC-1基因在细胞生长中的作用.方法: 运用反义技术将新近发现的人泛素缀合酶样蛋白基因CROC-1的适当长度cDNA片断克
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目的:建立CROC-1基因表达被阻断的FL-CROC-1-细胞系,研究CROC-1基因在细胞生长中的作用.方法: 运用反义技术将新近发现的人泛素缀合酶样蛋白基因CROC-1的适当长度cDNA片断克隆到本室改建的真核细胞表达载体pMAMneo-amp-中,经限制性内切酶图谱分析筛选出反向插入的表达CROC-1反义RNA的重组质粒.将此反义表达重组质粒(pMAM-antiCROC-1)用改良的磷酸钙法转染人羊膜FL细胞并用含G418的培养基筛选,测定G418抗性的FL-CROC-1- 细胞系的生长速度.结果:建立的FL-CROC-1- 细胞系在地塞米松诱导下CROC-1基因表达被反义抑制后,其生长速度较对照FL细胞及转染了载体pMAMneo-amp- 的FL细胞(FL-MAMneo)的明显要慢(P＜0.05).结论:本研究成功地建立了CROC-1基因表达被阻断的FL-CROC-1- 细胞系,并提示CROC-1基因编码的泛素缀合酶样蛋白在细胞生长中起正调控作用.
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