HBsAg重组腺病毒载体的包装和表达

来源 :中山大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：atta2002

【摘要】

：

为探索腺病毒载体在基因治疗中的应用及其表达目的抗原的有效性．用ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ双切质粒ｐＢｌｕｓｃｒｉｐｔＫＳ＋－ＨＢｓ；回收Ｓ基因片段，定向克隆插入质粒…ｐＡＣＣＭＶｐＬ中相应的酶切位点，通过快速抽提、酶切鉴定筛选重组质粒．将重组

【作者】

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周智姚集鲁卢建溪陈文思刘淑芳

【机构】

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中山医科大学附属第三医院传染病科实验室!广东广州510630,中山医科大学附属第三医院传染病科实验室!

【出处】

：

中山大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2000年S2期

【关键词】

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病毒性肝炎乙型腺病毒载体 DNA重组 hepatitis B virus adenoviral vector DNA recombinant

【基金项目】

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第26届中国博士后基金资助项目!（［1999］ 17）,中山医科大学科研启动基金资助项目

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为探索腺病毒载体在基因治疗中的应用及其表达目的抗原的有效性．用ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ双切质粒ｐＢｌｕｓｃｒｉｐｔＫＳ＋－ＨＢｓ；回收Ｓ基因片段，定向克隆插入质粒…ｐＡＣＣＭＶｐＬ中相应的酶切位点，通过快速抽提、酶切鉴定筛选重组质粒．将重组质粒与ｐＪＭ１７共转染２９３细胞进行包装，挑取单个空殊感染２４孔板中的２９３细胞，取上清ＨＢｓＡｇＡ值最高的重组病毒扩大培养，纯化和满度测定。并感染ＰＡ３１７、ＨｅＰＧ２、Ｖｅｒｏ细胞，检测ＨＢｓＡｇ的表达。挑取的２０个空斑感染２９３细胞后，９个ＨＢｓＡｇ阳性．扩大

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