【摘 要】
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尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f.sp.cubense是威胁香蕉生产的重要土传病原真菌,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的栽培品系.Argonaute蛋白(AGO)介导的RISC复合体在RNAi干扰中起到重要作用.Foc4含有两个进化上高度保守的AGO蛋白,本研究利用同源重组技术获得了△ago1、△ago2和△ago1/2基因缺失突变体,并对其突变体的生物学表型、非生物胁迫、致病力及小RNA发生进行分析.与Foc4相比,缺失突变体不影响菌丝的营养生长,但是分生孢子产量
【机 构】
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中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口 571101;农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室,海南海口 571101;海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室,海南海口 571101
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尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f.sp.cubense是威胁香蕉生产的重要土传病原真菌,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的栽培品系.Argonaute蛋白(AGO)介导的RISC复合体在RNAi干扰中起到重要作用.Foc4含有两个进化上高度保守的AGO蛋白,本研究利用同源重组技术获得了△ago1、△ago2和△ago1/2基因缺失突变体,并对其突变体的生物学表型、非生物胁迫、致病力及小RNA发生进行分析.与Foc4相比,缺失突变体不影响菌丝的营养生长,但是分生孢子产量下降,对巴西蕉的致病力明显减弱.其次,在hpRNA诱导的基因沉默中,AGO1主要负责产生siRNA介导基因沉默.最后,sRNA测序显示,缺失突变体的sRNA长度分布和5\'-端首位碱基出现频率都发生了改变,并且都能产生自身特异性miRNAs.另外,本研究还鉴定到不依赖AGOs形成的miRNA.这些结果说明Foc4的AGOs在调控产孢量、非生物胁迫、致病力,以及小RNA发生中发挥作用.本研究为揭示Foc4小RNA发生的分子遗传机制奠定理论基础.
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