穿梭质粒pCEPmB_7的构建及其对小鼠宫颈癌U_14细胞体内生长的影

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目的:构建可有于肿瘤基因治疗研究的基因表达载体pCEPmB7,并研究该质粒转染小鼠宫颈癌U14细胞后的体内致瘤性变化。方法:(1)用限制性核酸内切酶HindⅢ和XboⅠ分别对质粒pCEP4和pLXSNmB7进行双酶切,分别回收10.4kb的线性pCEP4DNA片断和0.9kb的mB7cDNA片断,将上述两片断混合,在T4-DNA连接酶的作用下连接,连接液转化受体菌TG-1,琼脂糖凝胶电泳鉴定连接是否正确;(2)用电穿孔法将pCEPmB7转染U14细胞,转染后的细胞经HygromycinB(200μg/ml
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