【摘 要】
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目的通过建立不同的酶切体系,找寻酶切效果好、胶回收试剂盒纯化DNA得率高的实验设计。方法使用XhoI单酶切重组质粒peDNA3-P2X4,酶切体系的体积分别为:150μl、160μl、170μl、
【机 构】
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武汉科技大学医学院细胞与分子生物学研究所,湖北省丹江口汉江集团汉江医院心内科
【基金项目】
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湖北省自然科学基金(2004ABA152);湖北省教育厅重点项目(D20081108)
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目的通过建立不同的酶切体系,找寻酶切效果好、胶回收试剂盒纯化DNA得率高的实验设计。方法使用XhoI单酶切重组质粒peDNA3-P2X4,酶切体系的体积分别为:150μl、160μl、170μl、180μl;酶切体系组成为:dddH20(补足体积)、BufferR(应用浓度是酶切体积的10%)、质粒DNA(无论所得质粒浓度如何,琼脂糖凝胶电泳胶回收的DNA上样量统一为23μg),XhoI10μl(6μl、4μl两次加入);反应温度为:37℃;酶切的时间为2—3h。结果酶切体系越大,所需要的酶切时间越短、酶
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