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目的抗CD3单抗包被技术与传统方法培养获得的抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞(anti-CD3monoclonal antibody activated killer cells,CD3AK)、细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)的体外扩增、体外杀伤活性及免疫表型的比较,以期为选择增殖更快、抗癌效应更强的生物活性细胞供临床治疗。方法健康人外周血单个核细胞,分别采用抗CD3单抗包被技术与传统方法培养获得CD3AK细胞、常规方法培养获得CIK细胞,检测各免疫活性细胞对K562耐药细胞株(K562/ADR)的杀伤活性、细胞膜P-糖蛋白(P-glucoproteins,P-gp)表达以及收获时细胞表型、上清液细胞因子含量。结果培养第13天时,包被技术获得CD3AK细胞和CIK细胞计数分别为非包被培养的1.41倍、2.96倍;3组细胞免疫表型差异均无统计学意义(P<0.05);但上清液中白细胞介素2(IL-2)水平3组分别为(47.97±3.24)ng/L vs(40.14±2.26)ng/L vs(35.90±3.33)ng/L,IL-12为(128.50±14.82)ng/L vs(110.69±10.02)ng/L vs(98.24±10.30)ng/L,肿瘤坏死因子α(TNF-α)为(154.42±16.99)ng/Lvs(143.67±14.24)ng/L vs(121.56±13.62)ng/L,γ干扰素(IFN-γ)为(143.79±12.97)ng/L vs(115.87±13.24)ng/L vs(102.50±10.47)ng/L,包被培养CD3AK细胞组高于其他两组(P<0.05)。3组细胞在不同效价比对K562/ADR细胞杀伤活性差异无统计学意义(P>0.05),与K562/ADR细胞作用后P-gp蛋白表达均下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论抗CD3单抗包被技术可以在短时间内获得更大数量的免疫活性细胞,抗肿瘤细胞活性肯定,是一种更为有效的培养方式。