【摘 要】
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目的探讨人骨髓间充质干细胞（hBMMSCs）来源外泌体miRNA-320a调控CXC趋化因子配体9（CXCL9）表达在类风湿关节炎（RA）中的作用及机制。方法分离并鉴定h BMMSCs来源外泌体。收集于医院接受关节置换术的RA患者关节滑膜组织,制备类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASFs）。q RT-PCR法检测RASFs和hBMMSCs来源外泌体中miRNA-320a和CXCL9表达。双荧光素酶报
【机 构】
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四川省医学科学院·四川省人民医院骨科
【基金项目】
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四川省科技计划（2020YFS0416）；
论文部分内容阅读
目的探讨人骨髓间充质干细胞（hBMMSCs）来源外泌体miRNA-320a调控CXC趋化因子配体9（CXCL9）表达在类风湿关节炎（RA）中的作用及机制。方法分离并鉴定h BMMSCs来源外泌体。收集于医院接受关节置换术的RA患者关节滑膜组织,制备类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASFs）。q RT-PCR法检测RASFs和hBMMSCs来源外泌体中miRNA-320a和CXCL9表达。双荧光素酶报告基因验证miRNA-320a与CXCL9靶向关系。分别采用CCK-8法和Transwell实验,检测BMMSCs来源外泌体miRNA-320a通过下调CXCL9对RASFs增殖和迁移的影响。结果 RASFs中miRNA-320a呈异常低表达,与hBMMSCs来源外泌体共培养后,miRNA-320a表达显著上调（P<0.05）;miRNA-320a+CXCL9 WT组荧光强度显著低于miRNA-NC+CXCL9 WT组（P0.05）;与miR-NC+oe-NC组比较,miR-320a mimic+oe-NC组miR-320a表达显著增加,CXCL9 mRNA表达显著降低,RASFs增殖和迁移能力显著下降（P<0.05）;与miR-320a mimic+oe-NC组比较,miR-320a mimic+oe-CXCL9组CXCL9 mRNA表达显著增加,RASFs增殖和迁移能力显著上升（P<0.05）。结论 h BMMSCs来源外泌体miRNA-320a可通过靶向下调CXCL9水平,抑制RASFs增殖和迁移,miR-320a有可能成为RA诊断标志物和潜在治疗靶点。
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