HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化

来源 :中南大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zyfscu

【摘要】

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目的：建立HSF1^-/-，HSF1^＋/＋两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系，为HSF1的功能研究提供实验模型。方法：用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入HSF1^-/-，HSF1^＋/＋两种基因型小

【作者】

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刘梅冬张华莉龚环宇陈广文王慷慨鄂顺梅肖献忠

【机构】

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中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,中南大学湘雅三医院

【出处】

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中南大学学报：医学版

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

HSF1 基因敲除胚胎成纤维细胞永生化 SV40 T抗原 heat shock transcription factor 1 knockout emb

【基金项目】

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国家自然科学基金（30330280）,国家自然科学基金（30371382）

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目的：建立HSF1^-/-，HSF1^＋/＋两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系，为HSF1的功能研究提供实验模型。方法：用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入HSF1^-/-，HSF1^＋/＋两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞，经G418筛选，抗性克隆扩大培养，建立永生化细胞系；用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合，用RT—PCR法鉴定SV40T基因在转染细胞中的表达；用Western blot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白70的表达情况。结果：有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月，经鉴定S

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