人脑胶质细胞来源神经营养因子基因的克隆及测序

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为研究人脑胶质细胞来源的神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)在神经系统疾病中的作用,根据GDNF的cDNA序列设计并合成引物,以流产胎儿脑组织为来源,分别提取RNA和基因组DNA作模板,经RT-PCR和PCR技术扩增人GDNF基因片段,采用DNA重组技术将其克隆于pGEM-T Easy载体中并测序.结果:RNA和基因组DNA体外扩增得到的片段均是410 bp,两者无差异.PGEM-GDNF经酶切鉴定正确,测序结果与Genebank比较基本相同.由于RNA和基因组DNA扩增得到的片段大小相同,证实该基因片段内无内含子插入,该片段可用于真核及原核表达.
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