【摘 要】
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为研究牦牛源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida, Pm）rpoE基因在Tibet-Pm1菌株中的部分生物学特性，试验利用同源重组技术筛选出rpoE基因缺失株Tibet-Pm1-ΔrpoE,分析缺失株和原菌株Tibet-Pm1在外界环境生长、环境胁迫存活率、生物被膜形成、细胞黏附性和致病性上的差异。结果表明：利用同源重组技术成功构建出rpoE基因缺失株Tibet-Pm1-Δr
【基金项目】
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财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系项目（CARS-37）； 西藏自治区科技厅2019年度重点项目；
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为研究牦牛源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida, Pm）rpoE基因在Tibet-Pm1菌株中的部分生物学特性，试验利用同源重组技术筛选出rpoE基因缺失株Tibet-Pm1-ΔrpoE,分析缺失株和原菌株Tibet-Pm1在外界环境生长、环境胁迫存活率、生物被膜形成、细胞黏附性和致病性上的差异。结果表明：利用同源重组技术成功构建出rpoE基因缺失株Tibet-Pm1-ΔrpoE。缺失株的平均OD595值为0.135,显著低于Tibet-Pm1菌株的平均OD595值0.337（P＜0.05）。在20℃条件下，Tibet-Pm1-ΔrpoE菌株生长较缓慢，两种菌株的生长存在明显差异；不同温度下3 h内两种菌株生长的差异性较小。在紫外线照射条件下，Tibet-Pm1-ΔrpoE菌株的存活率由21.3%降到16.7%;在50℃高温条件下，Tibet-Pm1-ΔrpoE菌株的存活率由0.75%降到0.59%。在细胞黏附试验中，Tibet-Pm1-ΔrpoE菌株在MDBK中的黏附性由6.67×10~5 cfu降到1.20×10~5 cfu,两种菌株在PK15细胞中的黏附性差异不明显。在11 h内攻毒的家兔全部死亡，但以Tibet-Pm1-ΔrpoE菌株攻毒的家兔平均生存时间长，剖检死亡家兔可见部分器官出现充血或出血现象，盲肠充气。说明rpoE基因是Tibet-Pm1菌株的潜在毒力因子，缺失rpoE基因可抑制Tibet-Pm1菌株生物被膜的形成，影响其抵御外界环境的能力，黏附性下降，致病性降低。
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