β-淀粉样蛋白真核表达质粒的构建及鉴定

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目的 构建β-淀粉样蛋白真核表达质粒,为进一步开展老年性痴呆DNA疫苗的保护性研究打下基础。方法 提取Tg2576转基因鼠基因组DNA,PCR扩增β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)基因,用限制性内切酶Kpn I/Xho I分别对扩增产物和真核表达质粒pcDNA3.1酶切,将目的基因定向克隆到peDNA3.1载体上;对重组质粒进行双酶切初步鉴定后进行序列测定。结果 特异扩增出Aβ1-42片段,大小为126bp,片段成功插入pcDNA3.1载体中。经双酶切及序列测定结果表明Aβ1-42目的基因正确重组入pcDNA
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