细胞工厂在乙型脑炎减毒活疫苗生产中的应用

来源 :国际生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxw364963027
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目的

采用40层细胞工厂(CF40)替代15 L转瓶工艺制备乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗。

方法

分别采用CF40和15 L转瓶工艺制备乙脑减毒活疫苗,通过显微镜观察和细胞计数来考察细胞质量。病毒收获时观察细胞病变情况,并对2种工艺制备的原液、半成品以及成品进行病毒滴度检测对比,成品37 ℃放置7 d考察成品热稳定性。

结果

两种工艺相比,CF40细胞密度高于15 L转瓶,差异有统计学意义(F=10.60,P

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目的用短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因分型法对人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞进行鉴定,确认无污染。方法选取人源细胞的20个STR位点进行等位基因PCR扩增及荧光检测,将得到的STR图谱与美国典型培养物保藏中心和德国微生物菌种保藏中心数据库比对分析。结果两株细胞均得到清晰的STR特征性图谱,未出现3单位基因,在两个数据库中均找到与其细胞分型完全匹配的细胞株。结论人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞均为正确细胞株,不存在污染和交叉污染。