目的建立液质联用（HPLC-MS/MS）法测定大鼠肺部透析液中头孢哌酮/舒巴坦的浓度。方法微透析样品通过HPLC-MS/MS检测,用Agilent Elipse XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.125%甲酸水,等度洗脱,以负离子扫描多反应监测扫描方式进行检测。检测的离子对头孢哌酮m/z 644.2→m/z 115.2,舒巴坦m/z 232.0→m/z 140.0,内标奥美拉唑m/z344.3→m/z 194.1。结果头孢哌酮/舒巴坦的线性范围分别为0.2²0μg·mL^-1,0.05¹0μg·mL^-1;日间和日内精密度相对偏差均小于15%;准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。结论本方法灵敏度高,操作简便快捷,适用于微透析样品中头孢哌酮/舒巴坦的浓度测定。