【摘 要】
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为表达蓝舌病病毒（BTV）VP5蛋白并检测其生物学活性，本实验采用RT-PCR方法扩增血清12型BTV的VP5基因，构建重组质粒pMAL—VP5。将重组质粒转化TB感受态细胞，以0．4mmol／L的IPTG进行诱导
【机 构】
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南京农业大学动物医学学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,南京农业大学公共管理学院
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金(30901082)
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为表达蓝舌病病毒（BTV）VP5蛋白并检测其生物学活性，本实验采用RT-PCR方法扩增血清12型BTV的VP5基因，构建重组质粒pMAL—VP5。将重组质粒转化TB感受态细胞，以0．4mmol／L的IPTG进行诱导表达，SDS-PAGE电泳结果显示，融合了大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）标签的VP5重组蛋白以可溶形式表达，分子质量约为112．2ku。利用MBP标签对重组蛋白进行纯化，并以其作为包被抗原，间接ELISA检测山羊血清样品，结果5份羊血清P／N值均大于1，其中有1只羊检测结果P／N值为2．396
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