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目的
构建阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株，并探讨blaNDM-1基因缺失对阴沟肠杆菌生物学特性的影响。
方法采用Red同源重组技术构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株并通过PCR和RT-qPCR法进行验证，对原始菌株和blaNDM-1敲除株进行药敏试验、生长曲线绘制和体外竞争试验。
结果PCR、DNA测序和RT-qPCR表明成功构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株。药敏试验显示原始菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均耐药，而blaNDM-1敲除株对其均敏感；原始菌株和基因敲除株在LB液体培养基中具有相似的增殖曲线；两者体外竞争试验的竞争指数值为0.69。
结论Red同源重组技术可用于阴沟肠杆菌基因的敲除，且blaNDM-1基因对阴沟肠杆菌的耐药性及竞争力都有影响。