目的筛选出水蛭活血化瘀作用的抗凝血反应体系,并基于该反应体系建立水蛭体外生物活性法,为水蛭的质量控制奠定基础。方法将不同浓度的水蛭浸提液加入富血小板血浆(PRP)和乏血小板血浆(PPP)中,分别测定6 min内的血小板最大聚集率和凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原-凝血酶时间(Fibg-TT),观察水蛭浸提液浓度与上述指标的量效关系。结果水蛭能增加血小板聚集率,对凝血酶原时间未见显著性的影响,能显著延长活化部分凝血酶时间、凝血酶时间和纤维蛋白原-凝血酶时间,在一定的浓度范围内,水蛭浸提液浓度与凝血酶时间和纤维蛋白原-凝血酶时间对数凝固时间呈现较好的线性关系(r1=0.987 4;r2=0.995 0),与活化部分凝血酶时间凝固时间同样具有较好线性关系(r3=0.997 0),因此可以采用生物检定法中的量反应平行线法测定水蛭的抗凝血活性。结论活化部分凝血酶时间、凝血酶时间和纤维蛋白原-凝血酶时间反应体系可以用于水蛭体外生物活性测定方法的建立,量化水蛭的抗凝血活性(效价),为水蛭的质量控制奠定基础。