利用环介导等温扩增技术(LAMP)检测烟粉虱体内的瓜类褪绿黄化病毒(CCYV)

来源 :华中三省(湖北、湖南、河南)昆虫学会2012年学术年会暨全国白蚁防治学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hxhx1122
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瓜类褪绿黄化病毒由烟粉虱B和Q型半持久性传播,本试验的目的是建立一个可以快速检测烟粉虱体内是否携带CCYV病毒的LAMP体系,为后续研究烟粉虱传毒行为试验中快速检测病毒奠定基础。通过对LAMP体系检测CCYV的初步探索,对外引物和内引物的浓度比、MgSQ4浓度、甜菜碱浓度、反应温度和反应时间等条件设立梯度,通过筛选最优条件确立了LAMP体系。利用已建立的LAMP体系进一步试验,通过检测CCYV病毒和烟粉虱传播的番茄黄化曲叶病毒、烟草曲叶病毒、西瓜曲叶斑驳病毒确定LAMP方法的特异性,结果为已确立的CCYV LAMP体系只能特异性地检测CCYV病毒;通过对模板进行梯度稀释,分别进行LAMP检测和PCR检测(引物为F3和B3),比较电泳结果确定LAMP方法的灵敏度,结果为LAMP方法检测病毒的灵敏度为PCR方法的10倍。
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