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目的:评定高效液相色谱法（HPLC）测定人脑脊液中万古霉素（vancomycin,VCM）浓度的不确定度。方法:分析并评定HPLC法测定人脑脊液中VCM浓度过程中的不确定度来源并进行合成。结果:人脑脊液中VCM低浓度(13.2μg·m L-1)和高浓度(438μg·m L-1)的扩展不确定度分别为1.03和22.0μg·m L-1（P=95%,k=2）。结论:HPLC法测定人脑脊液中VCM浓度的不确定度在低浓度时主要由回收率、基质效应和生物样品配制引入,在高浓度时主要由基质效应、生物样品配制和重复性引入。