VMP1基因的克隆及其抗体的制备与鉴定

来源 :厦门大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tuoba888
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为了得到效价高、特异性强、能用于检测内源性VMP1蛋白的抗体,采用RT-PCR法,从L929细胞株中克隆鼠VMP1基因,重组入pCMVS载体,用PCR扩增与其氨基酸132-239区域对应的DNA片断,将该片段连接到原核表达载体pGST parallel中,在大肠杆菌BL21菌株中大量表达,经谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化后,得到高纯度的VMP1抗原.免疫新西兰兔,获得抗VMP1蛋白的兔抗血清,将血清纯化后即得到抗VMP1的多克隆抗体.用Western blot分析手段检测了该抗体的特异性及效价.在用该抗体检测外
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