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目的
探讨胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路在miR-433诱导胃癌细胞凋亡中的作用。
方法使用慢病毒转染胃癌BGC-823细胞株使其过表达miR-433,实验设置空白对照组(BGC-823)、阴性对照组(BGC-823+ miR-433空载体)和实验组(miR-433+ miR-433,BGC-823-pMD18-T- miR-433)。经过相应处理后胃癌细胞株BGC-823分别于培养后24、48、72 h后使用cck-8试剂盒行细胞活性检测和Annexinv-FITC细胞凋亡实验,并于培养72 h后使用BCA法蛋白定量对ERK1/2检测其蛋白表达。
结果体外培养的BGC-823+miR-433细胞生长活性在48 h(0.387±0.005)和72 h(0.614±0.009)时间点上显著低于BGC-823细胞(0.544±0.009、1.008±0.012)和BGC-823+miR-433阴性对照细胞(0.526±0.008、0.964±0.006),差异均有统计学意义;BGC-823+miR-433细胞凋亡指数在24、48 h和72 h时显著增加;ERK1/2的表达在BGC-823+miR-433细胞培养72 h后显著低于BGC-823细胞组和BGC-823+miR-433阴性对照组;在各个检测中BGC-823细胞和BGC-823+miR-433阴性对照细胞差异均无统计学意义。
结论ERK1/2在miR-433诱导胃癌细胞凋亡中起重要作用。