【摘 要】
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目的 探讨金雀异黄素(Gen)对甲状旁腺激素(PTH)引起的人近曲小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)的调控作用.方法 应用实时定量-聚合酶链反应(real time-PCR)、Western蛋
【机 构】
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济南军区总医院肾内科,上海交通大学附属第一人民医院肾内科
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目的 探讨金雀异黄素(Gen)对甲状旁腺激素(PTH)引起的人近曲小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)的调控作用.方法 应用实时定量-聚合酶链反应(real time-PCR)、Western蛋白印迹、报告基因等技术,观察Gen对PTH诱导人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞CTGF表达的影响.使用MAPK通路抑制剂U0126阻断信号通路以明确Gen发挥作用的机制.结果 HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA和蛋白表达,PTH刺激后其表达量显著增加(P＜0.05).10~(-10)mol/L PTH作用12h后,荧光素酶活性较对照组明显升高(1.8884±0.0780比0.9891±0.0300,P＜0.01).Gen剂量依赖性下调PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达.正常HK-2细胞有少量磷酸化(P)ERK1/2表达,PTH刺激后p-ERK1/2表达明显升高,以10~(-10)mol/L PTH作用30 min时效应最强.U0126作用后,CTGF mRNA、蛋白表达均明显下降(P＜0.05).Gen抑制PTH所致的HK-2细胞ERK1/2活化.结论 Gen可通过阻断MAPK信号通路抑制PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达.
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