自身猝灭探针定量PCR检测HCV方法的建立

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目的建立自身猝灭荧光探针定量PCR技术检测HCV方法。方法构建重组质粒pMD18-T-HCV5′NCR作为标准品,并通过Sigma在线软件设计自身猝灭探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价。结果建立了自身猝灭荧光探针的定量PCR方法,线性为10^1-10^10copies/μl;灵敏度达50copies/μl;批内CV为6.1%,批间CV为6.5%,日间CV为6.8%;特异性为100%,与其他肝炎病毒无交叉反应。与紫外定量方法比较,结果差异无显著性,且高度相关。结论以自身猝灭荧光探针建立的HCV荧光定
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