大白菜抗霜霉病同源基因的筛选与亚克隆文库的构建

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根据植物抗霜霉病基因保守区设计简并引物,利用三维PCR方法对大白菜(Brassica campestris ssp.pekien-sis)‘85-1’BAC文库进行筛选,从19 200个BAC克隆中筛选到含有目的基因的10个阳性克隆。利用HindⅡ对其中的94-G-17克隆进行酶切,回收1~5 kb的DNA片段并连接到载体pUCHindⅡ?BAP上,构建了含有6 200个克隆的亚克隆文库。经电泳检测,插入片段在1~5 kb。该亚克隆文库的构建为克隆大白菜抗霜霉病同源基因全长奠定了基础。
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