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制备了微米级甲基丙烯酸β-羟乙酯和N-乙烯基吡咯烷酮聚合物微球HEMA/NVP,再利用微球羟基与环氧氯丙烷发生亲核取代反应将环氧基引入微球表面,制得了表面含有环氧基的固定化酶载体EH-HEMA/NVP.利用红外光谱和化学分析法对载体进行表征,并考察载体对青霉素酰化酶的固定化效果.研究结果表明：载体EH-HEMA/NVP的溶胀性能优越,能较好的保持酶的活性;亲核取代反应时间会影响载体表面环氧基的含量;该载体对酶的固定较为牢固,重复使用14次以上仍然保持较高的相对活性.