【摘 要】
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目的克隆并表达bcr/abl融合基因片段,并制备其抗血清. 方法 PCR扩增包含蛋白融合点的bcr/abl癌基因片段,序列测定后克隆入带有His标签的原核表达载体pET-16b,转化宿主菌BL21,
【机 构】
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第四军医大学唐都医院血液科,第四军医大学基础部遗传与发育生物学教研室
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目的克隆并表达bcr/abl融合基因片段,并制备其抗血清. 方法 PCR扩增包含蛋白融合点的bcr/abl癌基因片段,序列测定后克隆入带有His标签的原核表达载体pET-16b,转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果, Ni-NTA树脂亲和纯化,皮下多点注射免疫小鼠,ELISA确认抗血清的滴度. 结果 PCR扩增得到大小约523 bp的目的片段,序列测定表明与发表序列完全一致;得到了一种新的癌基因bcr/abl片段的原核表达载体pET-16b-bcr/abl,在BL21中表达可
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