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目的:构建人Survivin基因的si RNA真核表达载体,探讨其对骨肉瘤细胞MG63中Survivin基因表达的干涉作用。方法:应用pSilencer3.0-H1neo构建Survivin特异性RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞。HE染色观察细胞形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。应用RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等方法检测Survivin的mRNA和蛋白水平变化。流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:成功构建了Survivin基因si RNA真核表达载体P