miR-578表达上调对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其与PREX2a的相关性分析

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目的 探讨上调miR-578对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其与PREX2a的相关性.方法 采取Western blot和qPCR两种方法检测不同级别的人脑胶质细胞瘤组织及正常脑组织标本中miR-578相对表达量.选取人恶性胶质瘤U87、U251细胞系进行miR-578对人脑恶性胶质瘤细胞增殖和凋亡影响的体外实验研究,分为miR-578类似物组及阴性序列组.qPCR及Western Blot分别检测转染后48 h的胶质瘤细胞中miR-578和PREX2a的表达,平板克隆形成实验检测转染后胶质瘤细胞细胞克隆形成数目,流式细胞术检测胶质瘤细胞凋亡情况.噻唑蓝(MTT)法检测胶质瘤细胞24、48、72 h时的相对生存活力.结果 qPCR结果显示胶质瘤组织标本中miR-578的相对表达量较正常脑组织标本明显降低(P<0.01).与阴性序列组比较,miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞的miR-578表达明显升高(P<0.05),miR-578的直接作用底物(PREX2a)表达则明显下降(P<0.05).MTT实验检测转染后48 h的miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞在24、48、72 h的生存能力较阴性序列组明显降低(P<0.05).平板克隆形成实验显示miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞克隆数较阴性序列组明显减少(P<0.05).流式细胞术检测miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞的凋亡能力较阴性序列组明显增强(P<0.05).结论 miR-578在胶质瘤细胞增殖和凋亡中发挥了明显的负性生物学作用,该过程可能与PREX2a相关.
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