研究叉头状转录因子O1(FoxO1)调节高糖下小鼠足细胞上皮间质转分化及与转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号通路的关系。
方法分别将持续激活突变型FoxO1慢病毒载体(LV-CA-FoxO1)、FoxO1短发夹样RNA慢病毒载体(LV-FoxO1-shRNA)和空慢病毒载体(LV-NC)转染足细胞。实验分5组：正常糖浓度组(5.6 mmol/L，A组)、高糖组(25 mmol/L，B组)、高糖＋LV-CA-FoxO1组(C组)、高糖＋LV-FoxO1-shRNA组(D组)、高糖＋LV-NC组(E组)。各组培养24、48、72 h后，实时荧光定量PCR、免疫印迹法检测FoxO1、TGF-β1、Smad3、nephrin、desmin的表达水平；细胞免疫荧光法观察FoxO1在足细胞中的定位；酶联免疫吸附法检测72 h上清中TGF-β1水平。
结果与A组相比，B组FoxO1 mRNA及蛋白表达无变化(均P>0.05)，磷酸化FoxO1(p-FoxO1)/FoxO1升高，TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达升高，p-Smad3/Smad3升高，nephrin表达减少，desmin表达增多，且nephrin及desmin变化呈时间依赖性(均P<0.05)。与B组相比，C组FoxO1 mRNA及蛋白表达升高，p-FoxO1/FoxO1降低，TGF-β1表达减少，p-Smad3/Smad3降低，nephrin表达增多，desmin表达减少(均P<0.05)。D组与B组相比，FoxO1 mRNA及蛋白表达降低，p-FoxO1/FoxO1降低，TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达升高，p-Smad3/Smad3降低，nephrin表达降低，desmin表达升高(均P<0.05)。
结论FoxO1可通过抑制TGF-β1/Smad3传导通路的激活，抑制高糖下足细胞发生上皮间质转分化。