【摘 要】
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目的 研究肿瘤转移抑制基因KAI1对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞黏附力、运动力和侵袭力的影响.方法 实验研究.应用脂质体转染法将含KAI1的真核表达质粒pCMV-KAI1转染人HXO-R
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院眼科
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目的 研究肿瘤转移抑制基因KAI1对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞黏附力、运动力和侵袭力的影响.方法 实验研究.应用脂质体转染法将含KAI1的真核表达质粒pCMV-KAI1转染人HXO-Rb44细胞株,命名为HXO-Rb44-KAI1,使其KAI1蛋白过表达.以转染空载体质粒pcDNA3.1(+)及未转染质粒的HXO-Rb44细胞作为对照,分别命名为HXO-Rb44-KAI1/zero及HXO-Rb44.质粒转染48 h后,吹散细胞,显微镜下观察三组细胞的同质性黏附情况；应用Transwell小室及其联合Matrigel分别进行迁移和侵袭实验.100倍光镜下观察进入Transwel下室的细胞并随机选取5个视野进行细胞计数,采单因素方差分析对三组细胞的迁移和侵袭能力进行比较.结果 质粒转染48 h后,PCR及Western Blot显示HXO-Rb44-1AI1细胞的KAI1表达明显强于HXO -Rb44-KAIl/zero及HXO-Rb44细胞.HXO-Rb44-KAI1细胞的同质性黏附力明显强于HXO-Rb44-KAI1/zero及HXO-Rb44细胞.Transwell迁移实验显示,100倍镜下下室中平均每视野细胞数,HXO-Rb44-KAI1组为(20.4±4.0)个,HXO-Rb44-KAI l/zero组为(46.0±4.5)个,HXO-Rb44组为(52.1±3.6)个,差异有统计学意义(F=256.71,P＜0.01.侵袭实验显示100倍镜下下室中平均每视野细胞数,HXO-Rb44-KAI1组为(16.7±3.3)个,HXO-Rb44-KAIl/zero组为(42.5±3.7)个,HXO-Rb44组为(47.3±5.2)个,差异有统计学意义(F=235.12,P＜0.01).结论 KAI1可显著增强HXO-Rb44细胞同质性黏附力,抑制其运动力和侵袭力.
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