成体人牙髓干细胞的分离与鉴定

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目的 从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能.方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养.扩大培养细胞克隆,检测STRO-1的表达.体外诱导分化后对各克隆从碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节形成、牙本质涎蛋白(DSP)表达、Oil Red-O染色、PPARr2基因表达等方面进行检测.结果克隆来源细胞STRO-1表达阳性.在矿化液诱导下,克隆细胞呈现明显高的ALP活性;能够形成矿化结节;可以分泌表达DSP,已向成牙本质细胞方向发生了分化.成脂肪诱导后,Oil Red-O染色阳性,可检测到PPARr2基因表达.结论从成体人牙髓组织中可以分离培养出干细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态。

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