【摘 要】
：
目的 观察蛋白转导域(PTD)-HBcAg融合蛋白的细胞膜穿透作用.方法 合成转录反式激活蛋白(Tat)-PTD编码序列,PCR技术扩增HBcAg全长基因,通过重叠延伸PCR片段拼接法将Tat-PTD编
【机 构】
：
上海交通大学附属第六人民医院感染科,200233
论文部分内容阅读
目的 观察蛋白转导域(PTD)-HBcAg融合蛋白的细胞膜穿透作用.方法 合成转录反式激活蛋白(Tat)-PTD编码序列,PCR技术扩增HBcAg全长基因,通过重叠延伸PCR片段拼接法将Tat-PTD编码序列和HBcAg全长基因融合,将融合基因克隆到pMAL-c2X原核表达载体中.挑选测序正确的构建质粒,转化大肠埃希菌Rosetta-gamiTM2(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷诱导融合蛋白表达,Western印迹鉴定,亲和层析纯化融合蛋白PTD-HBcAg,同样方法得到HBcAg蛋白作为对照.纯化蛋白加入细胞培养介质中,间接免疫荧光检测进入细胞内的PTD-HBcAg和HBcAg.结果 大肠埃希菌中过度表达的融合蛋白可通过亲和层析纯化,Western印迹证实纯化的PTD- HBcAg和HBcAg能被HBeAg单克隆抗体识别,细胞免疫荧光检测证实PTD-HBcAg可跨膜转导入细胞内,而单独的HBcAg未能在细胞内检测到.结论 融合蛋白PTD-HBcAg可在原核表达系统中高效表达、分离纯化,PTD能介导HBcAg穿透细胞膜进入细胞.
其他文献
目的 探讨吻合器痔上黏膜环切术(PPH)的护理方法.方法 对17例Ⅲ、Ⅳ期痔手术患者进行术后病情变化观察、排便护理、饮食指导、心理护理.结果 术后患者疼痛轻微,住院时间明显
对北兴特钢新上连铸机手动开浇和自动开浇程序控制进行热试车探索。
Beixing special steel on the new casting machine manual casting and automatic casting process co
Background The effectiveness and safety of initiating biphasic insulin aspart 30 in patients who were poorly controlled on oral glucose-lowering drugs were stud
Background Self-monitoring of blood glucose (SMBG) by individuals with type 2 diabetes (T2D) is crucial for long-term health,yet numerous cultural,economic and
当今社会提倡优生优育,独生子女是全社会普遍存在现象.因此,儿童倍受社会的关注和关爱.尤其是当孩子有病需要去医院治疗时,对孩子的这种关注和关爱就显得更加重要.“一切为了
目的评价不稳定型心绞痛(UAP)患者调整给药时间的作用。方法对112例不稳定型心绞痛患者随机分为观察组和对照组各56例,两组患者均给予阿司匹林,B受体阻滞剂,硝酸脂类等治疗。
前列腺增生(BPH)是以排尿困难为主的老年男性常见病.经尿道前腺汽化电切术(TUVP)联合经尿道前列腺电切(TURP),具有不开腹,创伤小,痛苦小,恢复快,并发症少等优点.是国际上公认
Background Statin therapy has affected glucose homoeostasis of type 2 diabetes patients,which could be related with bile acids metabolism.Whether bile acid meta